产品货号：
SK087-1
中文名称：
谷氨酸(Glu)含量测试盒(微量法)
英文名称：
产品规格：
100管/96样
发货周期：
1～3天
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Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
利用专用提取液提取，然后用显色剂进行显色，显色后在570nm下进行测定。
| 组分 | 规格 |
| 试剂一 | 120mL |
| 试剂二 | 1瓶 |
保存：2～8℃，有效期3个月。
临用前向试剂二粉剂中加入5mL蒸馏水充分溶解混匀，用不完的试剂仍4℃保存。
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
- 细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量(104个)∶试剂一(mL)＝500～1000∶1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g常温离心10min，取上清，置冰上待测。
- 组织样品：按照组织(g)∶试剂一(mL)＝1∶5～10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g常温离心10min，取上清，置冰上待测。
- 血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液(mL)∶试剂一(mL)＝1∶5～10的比例（建议取0.1mL血清（浆）或者细胞培养液加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g常温离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
- 在有盖EP管中加入下列试剂：
成分 测定管 对照管 样本 250 试剂一 250 试剂二 50 50 - 混匀，90℃水浴20min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，于570nm波长处记录吸光值A。△A＝A测定管－A对照管。对照管只要做一管。
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 标准条件下测定回归方程为y = 0.0074x- 0.5255；x为谷氨酸含量（μg/mL），y为吸光值。
- 按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算
谷氨酸含量(μg/mL)= [(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V3×V1÷V2）=1351×(△A+0.5255) - 按照蛋白浓度计算
谷氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V1×Cpr)=135.1×(△A+0.5255)÷Cpr - 按照样本质量计算
谷氨酸含量(μg/g鲜重)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(W×V1÷V2)=135.1×(△A+0.5255)÷W - 按照细菌或细胞密度计算
谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(500×V1÷V2)=0.27×(△A+0.5255)
V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；
V2：加入提取液体积，1mL；
V3：加入血清（浆）或细胞培养液体积，0.1mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
500：细菌或细胞总数，500万。 - 标准条件下测定回归方程为y = 0.0074x- 0.5255；x为谷氨酸含量（μg/mL），y为吸光值。
- 用96孔板测定的计算公式如下
- 标准条件下测定回归方程为y = 0.0037x- 0.5255；x为谷氨酸含量（μg/mL），y为吸光值。
- 按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算
谷氨酸含量(μg/mL)= [(△A +0.5255)÷0.0037×V1]÷(V3×V1÷V2）=2703×(△A+0.5255) - 按照蛋白浓度计算
谷氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(V1×Cpr)=270.3×(△A+0.5255)÷Cpr - 按照样本质量计算
谷氨酸含量(μg/g鲜重)= [(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(W×V1÷V2)=270.3×(△A+0.5255)÷W - 按照细菌或细胞密度计算
谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(500×V1÷V2)=0.541×(△A+0.5255)
V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；
V2：加入提取液体积，1mL；
V3：加入血清（浆）或细胞培养液体积，0.1mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
500：细菌或细胞总数，500万。 - 标准条件下测定回归方程为y = 0.0037x- 0.5255；x为谷氨酸含量（μg/mL），y为吸光值。
- 该试剂盒仅适用于发酵液或组织中谷氨酸含量测定，检测下限为100μg/mL。
- 标准曲线线性范围为：100μg/mL -600μg/mL。
- ΔA线性范围为：0.01-1；若大于1则需要将上清液用试剂一稀释至适当倍数后测定，计算公式中乘以相应稀释倍数。
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